【摘要】目的 探讨体外癫痫模型海马神经元中线粒体衔接蛋白Miro1表达的改变及其意义.方法原代培养新生24 h内的SD大鼠海马神经元,通过无镁细胞外液诱导体外癫痫模型.培养至14 d的海马神经元随机分为对照组(CON组)、无镁诱导组(AE组)、AE+对照腺病毒组(AE+rAd组)、AE+shRNA腺病毒组(AE+rAd-Miro1-shRNA组).CON组及AE组分别用正常细胞外液和无镁细胞外液作用3 h后,更换为正常维持液.AE+rAd组、AE+rAd-Miro1-shRNA组分别于无镁诱导48 h前转染对照腺病毒、靶向大鼠Miro1基因的shRNA重组腺病毒真核表达质粒.各组分别于造模后24 h终止细胞培养.采用Western blot法检测细胞内Miro1、ND6蛋白的表达,免疫荧光法检测细胞内ND6蛋白的表达,比色法测定丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)的蛋白浓度.结果 与CON组比较,AE组、AE+rAdv组大鼠海马神经元Miro1表达明显升高,AE+rAd-Miro1-shRNA组大鼠海马神经元Miro1表达明显降低(均P<0.05);AE组、AE+rAdv组、AE+rAd-Miro1-shRNA组大鼠海马神经元ND6表达及GSH蛋白浓度明显降低,MDA蛋白浓度明显升高(均P<0.05).AE+rAd-Miro1-shRNA组大鼠海马神经元Miro1、ND6表达及GSH蛋白浓度明显低于AE组和AE+rAdv组,MDA蛋白浓度明显高于AE组和AE+rAdv组(均P<0.05).结论 线粒体衔接蛋白Miro1可能对无镁致痫海马神经元有保护作用.抑制线粒体Miro1蛋白表达后,ND6、GSH蛋白表达减少,MDA蛋白表达增加,加重线粒体氧化应激损伤.